摘要:
以普通大肠杆菌（E.coli）为出发菌株,以L-谷氨酸、溴甲酚绿（pH3.8～5.4）为筛选及指示剂,经亚硝基胍（NTG）、UV诱变处理,得到L-谷氨酸脱羧酶活性变异菌株,其L-谷氨酸脱羧酶（GAD）活性大幅度提高,比出发菌株酶活性提高了2.22倍。优化试验显示：pH值、发酵时间、诱导剂L-谷氨酸、硫酸镁对GAD产酶有较大影响。通过对产酶发酵培养基中几种成分单因素变动及正交优化实验,对该菌株产GAD的诱导剂L-谷氨酸、营养要求和发酵条件进行了研究,优化后的发酵培养基组成为牛肉膏5g/L,蛋白胨10g/L,氯化钠3g/L,L-谷氨酸0.5g/L,葡萄糖1.5g/L,磷酸二氢钾2g/L,硫酸镁0.7g/L。发酵条件是：pH6.8,接种菌龄20h,发酵时间20h。在优化条件下突变菌株GAD活性可达6790.7U,是出发菌株的2.76倍。
