摘要:
目的:观察双氢青蒿素和顺铂在体外对A549及A549/CDDP细胞的作用,分析双氢青蒿素抗肺癌和逆转耐药效果.方法:①实验于2003-01/2003-09在解放军第四军医大学口腔医院临床药理基地实验室完成.②人肺腺癌A549细胞系亲代及耐顺铂细胞系A549/CDDP在含100 g/L小牛血清,含青链霉素各1×105 U/L的RPMI-1640培养液中,37 ℃,体积分数0.05 CO2饱和湿度条件下培养,2.5 g/L胰蛋白酶消化传代.③细胞增殖及增殖抑制实验采用四甲基偶氮唑盐检测法:取对数生长期A549和A549/CDDP细胞接种于96孔培养板中,每孔细胞数2×103培养12 h后加入适当浓度药物,顺铂浓度0.032～10.000 mg/L,单药组双氢青蒿素浓度3.2～1 000 nmol/L,联用组双氢青蒿素取100,320 nmol/L 2个浓度与顺铂联用,序贯治疗组先用双氢青蒿素100 nmol/L处理24 h后换液加顺铂,每组样本5个复孔,对照组加入等体积磷酸盐缓冲溶液,每孔中加入四甲基偶氮唑盐溶液(5 g/L)20 μL,在酶联免疫检测仪上测定各孔吸光度(A值),采用直线回归法计算药物的半数抑制浓度.④计量资料差异性比较采用方差分析.结果:①双氢青蒿素对A549细胞和A549/CDDP细胞的药物半数抑制浓度分别为(0.230±0.011)和(0.321±0.018)μmol/L;顺铂对A549细胞和A549/CDDP细胞药物半数抑制浓度分别为(0.270±0.014),(5.703±0.026) mg/L.②双氢青蒿素100,300 nmol/L联合用药组顺铂对A549/CDDP细胞的顺铂半数抑制浓度明显低于对照组[(2.255±0.114),(5.703±0.126)mg/L,P＜0.01].③序贯治疗组对A549/CDDP细胞的顺铂半数抑制浓度明显低于对照组[(2.523±0.115),(5.703±0.126)mg/L,P＜0.01]. 结论:①双氢青蒿素具有抗癌作用,并与顺铂有协同作用.②体外实验条件下,双氢青蒿素可抑制肺癌细胞生长,并且逆转A549/CDDP细胞对顺铂的耐药.
