摘要:
目的：探讨磷酸肌酸钠对网腔钙结合蛋白（Calumenin）沉默阿霉素损伤心肌细胞内质网应激信号通路作用。方法：培养乳鼠心肌细胞,构建稳定的慢病毒——Calumenin质粒,转染乳鼠培养心肌细胞,实验分为4组：对照组（正常细胞＋3mg/L阿霉素）、模型组（慢病毒感染细胞＋3mg/L阿霉素）、磷酸肌酸钠1组（正常细胞＋阿霉素＋磷酸肌酸钠）、磷酸肌酸钠2组（转染细胞＋阿霉素＋磷酸肌酸钠）。采用Western blotting技术检测各组心肌细胞Calumenin蛋白、内质网应激伴侣蛋白GRP78及内质网应激信号通路因子PERK、PATF-4PERK、eIF2ɑ、ATF-4、IRE1、CHOP表达。结果：①与对照组比较,模型组及磷酸肌酸钠2组心肌细胞Calumenin蛋白表达明显减少（P〈0.01）。②与对照组相比,模型组内质网应激伴侣蛋白GRP78及内质网应激信号通路因子PPERK、eIF2ɑ、ATF-4、IRE1、CHOP表达明显增多（P〈0.01）。③与模型组相比较,磷酸肌酸钠1组及磷酸肌酸钠2组内质网应激伴侣蛋白GRP78及内质网应激信号通路因子P-PERK、eIF2ɑ、ATF-4、IRE1、CHOP表达减少（P〈0.01）。结论：阿霉素损伤可能诱发ERS,并通过ERS凋亡信号通路PERK→P-PERK→eIF2a→ATF-4→CHOP/IRE1→CHOP引起心肌细胞凋亡;磷酸肌酸钠可抑制阿霉素损伤所诱导内质网应激介导的心肌细胞凋亡,这一作用机制可能是通过Calumenin蛋白抑制ERS及其凋亡信号通路PERK→P-PERK→eIF2a→ATF-4→CHOP/IRE1→CHOP实现的。
