摘要:
血管内皮功能已经越来越受到人们的重视,研究表明高血压时血管内皮功能受到损害。本文旨在通过细胞培养的方法研究和比较目前临床常用的两种抗高血压药物复方降压片和西拉普利对血管内皮细胞功能的影响。
1 材料和方法
1.1 材料
1.1.1 脐带取自协和医院产科病房。
1.1.2 M-199、胎牛血清、胰酶、L-谷氨酰胺为GIBCO公司产品;ECGF、Hepes为Boehringer Mannheim公司产品;I型胶原酶为Sigma公司产品。氢氯噻嗪纯品由常州制药厂提供,西拉普利由罗氏药厂惠赠。TNF由邦定公司提供,AngⅡ为Sigma公司产品。
1.2 方法
1.2.1 内皮细胞培养:按鄂征的“组织培养技术”中的方法[1]进行脐静脉血管内皮细胞原代培养。24~36h换液,4~6d细胞铺满瓶底,用胰酶消化传代,1~3代细胞用于实验。
1.2.2 将细胞传入96孔板中,待细胞贴壁生长后,用M-199洗两次,加入含有刺激剂及药物的培养基。TNF用量为500u/mL。西拉普利(C),利血平(R),氢氯噻嗪(H)的浓度均为1×10-6。分组:空白组:TNF组;TNF+C;TNF+R;TNF+H;TNF+R+H。作用24h后吸取上清测定NO2-/NO3-、内皮素-1含量,样本数n=8。
1.2.3 一氧化氮测定:Griess法。采用解放军总医院提供的一氧化氮检测药盒。
1.2.4 内皮素-1测定:放免法。采用解放军总医院提供的内皮素-1检测药盒。
1.2.5 结果用均值±标准差(x—±s)表示,采用t检验比较结果的显著性。