摘要:
目的 评价二去水卫矛醇（dianhydrogalactitol,DAG）在肺癌NCI-H460细胞上的抗肿瘤作用,探讨其抗肿瘤作用机制。方法 采用CCK-8法、细胞克隆形成实验,评价DAG对NCI-H460细胞的增殖抑制作用。显微拍照观察细胞形态改变;Hoechst33342检测细胞核染色质的变化。Realtime PCR法检测拓扑异构酶Ⅱ（TopoⅡ）mRNA的表达水平。Westernblot法检测TopoⅡ蛋白表达水平。另外,应用计算机模拟分子对接技术来预测DAG与TopoⅡ的相互作用。结果 CCK-8法检测结果显示,DAG对NCI-H460细胞的体外抗肿瘤活性明显。细胞克隆形成实验结果表明,DAG能持续抑制肿瘤细胞的增殖。Hoechst33342检测细胞凋亡发现细胞核染色质发生明显改变。RealtimePCR和Western blot检测结果显示TopoⅡmRNA和蛋白表达量降低。计算机模拟分子对接显示DAG与TopoⅡ有相互结合作用。结论DAG能明显抑制NCI-H460细胞的增值,作用机制研究表明DAG能降低TopoⅡmRNA和蛋白水平,并与TopoⅡ结合,最终可能导致DNA双链断裂,引起细胞死亡。
