摘要:
目的：研究在人类Jurkat白血病细胞株中依托泊苷诱导凋亡的分子机制，揭示由依托泊苷启动的凋亡信号通路。方法：分别用annexinV—FITC和碘化丙啶（PI）染色，通过流式细胞仪测定annexin V阳性和出现亚二倍体DNA的凋亡细胞。以3，3’-dihexyloxyacarbocyanine iodide[DiOC6（3）]为染色剂，采用流式细胞术检测细胞线粒体膜电位的变化。采用离心技术分离细胞的胞浆与线粒体。细胞色素C从线粒体转入胞浆，caspase-3的激活，多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶（PARP）的切割等蛋白质的表达由免疫印迹技术（Western blotting）检测。结果：依托泊苷诱导Jurkat白血病细胞凋亡，细胞凋亡与依托泊苷的作用时间呈线性关系。广谱的caspase抑制剂zVAD．fmk可抑制依托泊苷诱导的DNA片段化和磷脂酰丝氨酸外翻。依托泊苷引起的线粒体膜电位下降早于DNA片段化和磷脂酰丝氨酸外翻，形成明显对照的是zVAD．fmk不能阻断依托泊苷诱导的线粒体膜电位的下降。依托泊苷介导细胞色素C从线粒体释放到胞浆，激活caspase-3，caspase-3的底物PARP被切割。结论：依托泊苷诱导Jurkat白血病细胞株凋亡的机制是降低线粒体膜电位和释放细胞色素C到细胞浆启动线粒体信号转导通路，最终激活caspase而导致细胞凋亡。
