摘要:
背景：抗骨增生胶囊在治疗骨关节疾病方面有很好的疗效，基础研究多集中于颈椎病等骨关节疾病上。目的：拟观察抗骨增生胶囊含药血清对白细胞介素10引起的软骨细胞增殖凋亡及基质金属蛋白酶分泌的影响。设计、时间及地点：分组对照体外细胞学实验，于2007-03／09在河北医科大学解剖教研室细胞培养中心完成。材料：新生1周SD大鼠，用于培养软骨细胞；体质量200g左右SD大鼠10只，以中药水溶液灌胃后定时取血制备含药血清。方法：采用胶原酶NB4消化法从大鼠关节软骨中分离出软骨细胞并进行原代和传代培养，实验分为3组：空白血清组：90％L-DMEM＋10％空白血清，每日给予同等量的生理盐水；白细胞介素10组（90％DMEM＋10％空白血清＋白细胞介素1β）；中药血清＋白细胞介素10组（90％DMEM＋10％中药血清＋白细胞介素1β）。白细胞介素10加入量为5μg／L，培养72h。将实验用细胞消化传代后制成单细胞悬液，以1×10^8L^-1的密度接种于96孔培养板，100μL/孔，每组6孔。主要观察指标：倒置显微镜下观察中药含药血清对软骨细胞增殖的影响；四甲基偶氮唑盐比色法检测其各孔吸光度变化；流式细胞仪分析凋亡细胞百分率；基质金属蛋白酶13Elisa试剂盒检测不同组基质金属蛋白酶13分泌情况。结果：在正常培养基条件下，细胞形态均匀，死亡脱落细胞较少。空白血清组软骨细胞的增殖速度缓慢，细胞较稀疏。白细胞介素10组细胞明显稀疏，部分细胞胞浆中空泡增多，细胞核形态不规则。在中药血清培养基作用下，软骨细胞增殖的速度较白细胞介素10组快，胞体显著增大，细胞核形态规则。白细胞介素1β组细胞增殖数量减少，凋亡细胞百分率增加，其培养的细胞上清液中基质金属蛋白酶13含量升高，抗骨增生胶囊含药血清可对抗白细胞介素10对
