摘要:
目的:观察具有活血化瘀、补气益肾、软坚散结作用的蜂贝化瘀胶囊对糖尿病大鼠糖脂代谢的干预以及微血管并发症的影响.
方法:实验于2001-07/2004-07在潍坊医学院分子免疫研究室完成.选用8周龄的清洁级健康雄性Wistar大鼠40只.①造模及分组:用0.1 mol/L枸橼酸钠缓冲液(pH 4.5)链脲佐菌素配成4.5g/L的溶液,按50 mg/kg单次腹腔注射,72 h后取大鼠尾静脉血查空腹血糖值达16.7 mmol/L的大鼠30只纳入实验.采用随机抽签法将大鼠分成2组:中药治疗组和糖尿病组,每组15只;同时另取与糖尿病大鼠体质量、鼠龄相匹配的健康大鼠15只作为正常对照组.②分组干预:中药治疗组:饲料中加用蜂贝化瘀胶囊中的粉末(蜂胶、丹参、葛根、贝母、生地、菟丝子、黄精及黄芪等),以21.6 g/kg喂养10周.糖尿病组及对照组:普通饲料喂服大鼠10周.③生物化学指标的测定:血浆醛糖还原酶活性测定:参照Vander等方法测定血浆醛糖还原酶的辅酶-还原型辅酶2的吸光度示醛糖还原酶活性.尿蛋白测定采用改良Lowry法.全血糖化血红蛋白含量测定:采用微柱亲和层析法.血脂测定:总胆固醇和三酰甘油测定均采用酶法.血清脂质过氧化物含量测定:脂质过氧化降解产物丙二醛含量,采用721分光光度计,按试剂盒说明测定.24 h尿蛋白测定:采用考马斯亮蓝法.按Green等方法用Greiss试剂测一氧化氮的代谢产物亚硝酸盐含量,间接反映一氧化氮含量.④血管平滑肌细胞3H-胸腺嘧啶核苷掺入率测定:以液闪仪测定各组血管平滑肌细胞的3H-胸腺嘧啶核苷掺入率,反映血管平滑肌细胞内的DNA合成量.⑤形态学观察:分别对肾脏和眼球切片进行苏木精-伊红和过碘酸-Schiff染色,光镜下观察肾脏及视网膜病理改变.制备肾脏和视网膜组织超薄切片,乙酸双氧铀和枸橼酸铅染色,透射电镜观察肾脏及视网膜超微结构的改变.⑥用t检验比较组间差�
