摘要:
目的 探讨以脱水保存角膜基质／后弹力层为载体培养角膜内皮细胞，构建组织 工程化角膜内皮细胞移植膜的可行性及其机理。设计实验性研究。研究对象体外培养的免角膜内皮细胞和脱水保存角膜基质／后弹力层。方法 兔角膜经中性蛋白酶37℃孵育5min，去除内皮细胞保留后弹力层和角膜基质，无水氯化钙脱水后低温保存，使用前磷酸盐缓冲液复水。纯化的角膜内皮细胞接种于基质载体的后弹力层上进行体外培养，直至生长融合为细胞单层，倒置显微镜下观察细胞形态学变化。在不同时间点（1、2、4、6d）收集植片进行HE染色和电镜检测，分析组织结构的变化。主要指标 角膜内皮细胞在脱水保存角膜基质／后弹力层载体上形成单层时间和生长特性，组织工程化角膜内皮细胞移植膜的三维结构和超微结构。结果 角膜内皮细胞在载体上快速贴壁生长并增殖，体外培养6～7d即融合成单层，复合角膜内皮组织由基质／后弹力层和单层扁平内皮细胞组成，与生理状态下的角膜内皮组织相近：电镜下组织培养的兔角膜内皮细胞间连接紧密，细胞为多边彤，胞核清晰，具有正常兔角膜内皮细胞的超微结构：结论 角膜内皮细胞能够在干燥脱水保存基质／后弹力层载体上良好生长，并形成形态结构与正常角膜内皮组织相似的细胞单层，为角膜内皮细胞移植提供了新的载体选择。（眼科．2006．15：164—168）
