摘要:
目的研究创伤微环境对表皮细胞的去分化诱导作用，并探讨Wnt通路在这一过程中的作用。方法包皮皮片去除皮下脂肪后，中性蛋白酶消化过夜，分离表皮和真皮。分离的表皮片用Ⅳ型胶原反复粘贴并冲洗去除表皮干细胞。处理后的表皮片经免疫组化鉴定后移植到BALB／c裸鼠背部全层皮肤缺损创面，5d后用免疫组化法检测皮片内细胞的表型特征，RT—PCR和Western blot检测表皮细胞表型转化过程中Wnts分子及下游分子的表达变化。结果未经处理的表皮片基底部细胞呈CK10染色阴性，CK19和β1整合素染色阳性；Ⅳ型胶原处理后的表皮片内细胞全呈CK10染色阳性。而去基底皮片移植后5d，在皮片的基底侧重新出现CK10染色阴性、CK19和β1整合素染色阳性的细胞。同时在移植皮片内Wnt-10b、Wnt-4和Wnt-7a mR—NA的表达分别增加了3．1倍、2．2倍和1．4倍，而Wnt通路下游β-catenin、cyclin D1和c—myc蛋白表达分别增加了3倍、1．5倍和2倍（P〈0．01）。结论创伤微环境可诱导表皮细胞去分化，Wnt／β-catenin信号通路可能在这一过程中起关键性的调控作用。
