摘要:
建立简单、灵敏、快速的高效液相色谱法，对甘草酸单铵盐原料药中主成分异构体进行分离以及同时与有关物质的分离检测，并对各待测物结构进行鉴定。参考欧洲药典7．0版（EP7．0）、英国药典2012版（BP2012）、中国国家药品标准（WS1-XG-2002）及国内外相关文献，对流动相的组成进行选择，通过优化流动相中盐的浓度、水系溶液的pH值、有机相的加入比例、柱温及流速等参数，确定了最佳的色谱条件：采用Durashell C18色谱柱（250mm×4．6mm，5μm），以0．01mol·mL^-1高氯酸铵（氨水调至pH8．2）-甲醇（48：52）为流动相，流速0．8mL·min^-1，检测波长254nm，柱温50℃，进样量10此。利用质谱、核磁共振谱、紫外光谱和液相色谱等实验技术对获得的18α-甘草酸、18β-甘草酸、有关物质A、有关物质B对照品结构进行确证，以保证其结构的准确无误；采用高效液相色谱法对法定机构提供的甘草酸单铵盐对照品进行定位，并采用二级管阵列检测器分析测定各待测物色谱峰的纯度。在优化的色谱条件下，18α-甘草酸、18β-甘草酸、有关物质A和B在0．50～100μg·mL^-1内线性关系良好p=0．9999），检出限分别为0．15、0．10、0．10和0．15μg·mL^-1。本方法检测灵敏、重现性好、结果准确可靠，可用于甘草酸单铵盐原料药主成分异构体及其与有关物质的同时分离检测。在EP7．0、BP2012收载的甘草酸单铵盐质量标准中，对主成分异构体的分离以及对色谱图中相对保留时间约为1．2的物质的结构归属有待商榷。本方法能够为甘草酸原料药、制剂以及中药材的质量标准的制定、质量控制及结构鉴定提供依据。
