摘要:
背景与目的：人参皂苷Rg3是一种抗肿瘤中药单体，有研究表明人参皂苷Rg3对肝癌、肺癌、结肠癌、胰腺癌等肿瘤细胞的浸润具有明显抑制作用。本实验目的是研究人参皂苷Rg3对人胰腺癌细胞株PANC-1中原癌基因Pim-3及磷酸化Bad蛋白pBad（Ser112）、Bad（Serl36）表达的影响。方法：用浓度为0、10、20、40和80μmol／L的人参皂苷Rg3处理PANC-1细胞24h后，用四甲基偶氮唑盐（MTF）法检测人参皂苷Rg3对PANC-1细胞增殖的抑制作用；用倒置显微镜和流式细胞术观察人参皂苷Rg3对PANC-1细胞凋亡的诱导作用；用Western blot法检测经不同浓度人参皂苷Rg3处理后的PANC-1细胞中pim-3、Bad、pBad（Ser112）和pBad（Ser136）的表达；定向克隆Pim-3的发夹状寡核苷酸（shorthairpinRNA，shRNA）到真核表达载体形成重组质粒pSilencer3．1-HINeo—Pim-3shRNA．将重组质粒通过脂质体介导转染PANC-1细胞，采用AnnexinV／PI流式细胞分析法检测转染后PANC-1细胞的凋亡．用Westernblot法检测转染后PANC-1细胞的pim-3及pBad（Serl12）的表达。结果：10、20、40和80btmol／L的人参皂苷Rg3对PANC-1细胞增殖的抑制率分别为20．2％、33．4％、52．8％、65．3％；经10～80μmol／L的人参皂苷Rg3处理后PANC-1细胞呈现明显的凋亡形态学改变，80μmol／L人参皂苷Rg3处理PANC-1细胞24h后，与正常对照组细胞凋亡率（3．3±2．1）％比较，处理组细胞凋亡率（12．2±1．3）％增加（P〈0．05）；人参皂苷Rg3处理PANC-1细胞24h后，Bad总蛋白表达没有明显变化。pim-3和pBad（Ser112）的表达均随人参皂苷Rg3浓度的增加而逐渐减弱。PANC-1细胞中pBad（Ser136）不表达；Pim-3shRNA转染PANC-1细胞后．与正常对照组比较，转染组早期凋亡率和总凋亡率均增加[（11．5±3．7）％VS．（5．8±2．2）％，P〈0．01；（20．8±2．6）％VS．（13．0±4．1）％，P〈O．05]，转染组pim-3及pBad（S
