摘要:
目的:利用测定电磁脉冲辐照原代培养海马脑神经细胞前后细胞内LDH和培养上清液中LDH、CHE、K+、Na+浓度及与时间的关系,探讨电磁脉冲对海马神经细胞损伤的机制.材料和方法:将新生的Wistar(24小时内)乳鼠断头,解剖镜下剔除脑膜、血管,分离出海马组织,将消化洗涤后的海马神经细胞稀释成1×106个/ml浓度的细胞悬液;然后以2 ml/皿的量,将细胞悬液种植到35 mm培养皿中,放入37℃、5%CO2-95%空气条件下培养.在培养12~14天时,高场强EMP模拟源(有界波模拟源),场强为6×104V/m,脉冲上升时间为20ns,脉宽为30μs,频率包含0~100MHz.以2.5次/分,辐照2分钟并于辐照后0h(即刻)、1 h、6h、12 h和24 h应用中生公司生化检测试剂盒测定细胞内和培养上清中LDH及培养上清液中CHE、K+、Na+浓度.结果:电磁脉冲辐照后即刻就可引起培养上清LDH明显升高;辐照后1 h细胞内LDH明显降低,而培养上清中LDH、CHE、和K+明显升高;辐照后6 h细胞内LDH明显降低,而培养上清中LDH、CHE、K+和Na+明显升高;辐照后12 h细胞内LDH明显降低,培养上清中CHE、K+和Na+明显升高;辐照后24 h所有上述指标基本恢复.结论:电磁脉中辐照后可损伤大鼠海马神经元细胞膜,表现为膜通透性升高或膜穿孔.