摘要:
背景：2003年研究发现一个全新的IⅡ型干扰素家族，即IFN-λs，包括λ1，2，3三种亚型。目的：对在毕赤酵母中高效表达重组人干扰素-λ1（rhIFN-λ1）进行产率纯度分析，理化性质、受体表达鉴定以及抗肿瘤活性初步探讨。
设计、时间及地点：单一样本观察，于2006—09／2008—07在中国医学科学院基础所生物化学与分子生物学系完成。
材料：含rhIFNλ1表达质粒的酵母菌种pA0815—4αF—IFN^I／GS115，人宫颈癌细胞系Hela细胞和HCT116细胞，为中国医学科学院基础所医学分子生物学国家重点实验室保存。
方法：诱导含rhIFN-λ1表达质粒的甲醇营酵母Pichiapastofis进行表达，表达产物经阳离子交换层析及凝胶层析纯化。主要观察指标：通过HPLC，质谱，毛细管电泳等鉴定其纯度及理化性质，反转录-聚合酶链反应及real-time荧光定量聚合酶链反应鉴定其在肿瘤细胞中特异受体的表达，应用四甲基偶氮唑盐比色法初步评价其抗肿瘤活性。结果：毕赤酵母表达的rhIFN-1表达水平约9．23mg／L，纯化后的纯度近90％。rhIFN-λ1等电点为8．01，相对分子质量为20960。在Hela和HCT116中均检测到rhIFN-λ1受体小亚基IL-10R2和特异大亚基IL-28RmRNA的表达，但U937细胞中未检测到IL-28RmRNA的表达。rhINF-λ1具有与IFN-α2a相似的降低细胞增殖的作用，但在经检测无或极少表达IL-28R的细胞中此作用不明显。结论：rhIFN-λ1可以在毕赤酵母中实现高效表达，表达产物的理化性质与天然IFN-λ1一致，具有与IFN-α2a相似的抗肿瘤活性，但对其特异受体分布少的骨髓造血系统降低增殖作用相对较弱。
