摘要:
本研究分别用巴斯德毕赤酵母、杆状病毒和大肠杆菌表达系统中表达的猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）TH-98株纤突蛋白（S）基因5’端含有B和C抗原位点的片段，利用Dot—ELISA方法对表达蛋白进行了抗原性比较分析，初步建立了以巴斯德毕赤酵母系统表达的重组蛋白为包被抗原的TGEVDot．ELISA检测方法。结果表明：两种真核系统中表达的重组蛋白的抗原性相对更强。抗原最佳包被量为50ng，抗体稀释度1：100．最适封闭液为10mg／L牛血清白蛋白，血清反应时间为60min；酶标二抗的工作浓度为1：1000，反应时间为30min，底物在室温显色时间为5min。本研究建立的Dot—ELISA方法对猪呼吸道冠状病毒、猪轮状病毒、猪瘟病毒和猪流行性腹泻病毒阳性血清的检测结果均为阴性，特异性良好。与SvanovaTGEV／PRCV抗体诊断试剂盒比较，此方法的特异性和符合率分别为90％和87％。
