摘要:
目的探讨3个拷贝人源分子佐剂C3d（hC3d3）与绒毛膜促性腺激素β亚基（hCGβ）的融合蛋白hCGβ-hC3d3作用于人外周血单个核细胞（PBMC）对hCGβ抗原免疫原性的影响。方法用L-亮氨酸甲基酯（L- LME）或B细胞磁珠阴性分离试剂盒对人PBMC进行细胞分离纯化;实验分成B细胞、B＋T细胞、PBMC和Raji细胞4组。分别应用1、10及100 nmol／L不同浓度的hCGβ、hCGβ-hC3d3及美洲商陆（PWM）等抗原体外作用于以上细胞10～12 d,采用氚标记的胸腺嘧啶核苷（3H-TdR）掺入法了解不同抗原刺激后各组细胞的增殖情况;用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测培养上清液中抗hCGβ抗体的分泌水平;而酶联免疫斑点法（ELISpot）可测定各种抗原刺激后特异抗体分泌的细胞数量。结果与hCGβ相比,融合蛋白hCGβ-hC3d3能使各组细胞增殖明显升高,且呈浓度依赖性。应用100 nmol／L的不同抗原培养12 d后,取培养上清液进行ELISA检测,经hCGβ及PWM刺激后,上清液中均未检测到抗hCGβ特异性抗体;经hCGβ-hC3d3培养后则在B＋T细胞及PBMC组中见低水平抗hCGβ抗体。采用ELISpot法分析抗hCGβ特异性抗体生成细胞,经hCGβ刺激的细胞仅有数个散在的阳性细胞;而经hCGβ-hC3d3刺激后,阳性细胞明显增多（P〈0．05）。结论hC3d3明显促进人免疫活性细胞对hCGβ抗原的免疫原性。
