摘要:
目的 采用细胞工厂替代转瓶培养Sabin株脊髓灰质炎病毒，制备脊髓灰质炎减毒活疫苗。方法用细胞工厂和15L转瓶分别培养人二倍体细胞（2BS），扩增至36代后，分别接种0.20MOI的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型Sabin株脊髓灰质炎工作代毒种，待细胞病变达100％时收获病毒液，加入保护剂（4.5mol／L氯化镁溶液），制备单价疫苗，分别将Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ3个型别的单价疫苗按照病毒数10：1：6的比例混匀，制备成三价疫苗半成品，分装入1ml西林瓶中（每瓶为10人份剂量），即为疫苗成品。采用微量滴定法测定疫苗原液及成品的病毒滴度，同时进行其他各项检定，并考察疫苗成品的稳定性。结果采用相同的感染复数接种病毒，细胞工厂制备的3个型别疫苗原液的病毒滴度均高于转瓶制备的疫苗原液，Ⅰ型平均滴度高0.17 log10 CCID50／ml，Ⅱ型平均滴度高0.33 log10 CCID50／ml，Ⅲ型平均滴度高0.27 log10 CCID50／ml；细胞工厂制备的疫苗成品3个型别的病毒滴度均高于转瓶制备的疫苗，三价疫苗的平均滴度均高于6.24 log10 CCID50／ml，符合国内外标准；疫苗原液及疫苗成品的其他各项检定均合格；细胞工厂制备的3批疫苗成品于37℃放置2d，疫苗的总病毒含量不低于6.24 log10 CCID50／0.1ml，且病毒滴度下降未超过0.5 log10 CCID50／0.1ml，于2～8℃放置9个月，疫苗的总病毒含量仍不低于6.24 log10 CCID50／0.1ml，均符合WHO的标准要求。结论利用细胞工厂替代转瓶培养2BS细胞制备脊髓灰质炎减毒活疫苗，可获得高于转瓶培养3个型别疫苗的滴度，且工艺稳定，质量可控，可用于规模化脊髓灰质炎减毒活疫苗的生产。
