摘要:
目的探讨CD44分子岩藻糖基化修饰对兔BMSCs流体黏附力的影响。方法采用密度梯度离心结合贴壁培养的方法体外分离纯化获得兔BMSCs,倒置显微镜观察细胞生长状况,流式细胞仪检测细胞表面MSCs相关抗原CD44、CD34、CD29、CD105的表达。使用α-1,3-岩藻糖转移酶Ⅵ（α-1,3-fucosyltransferaseⅥ,FTⅥ）对兔BMSCs进行体外岩藻糖基化处理作为实验组,以未经岩藻糖基化处理的BMSCs作为对照组,采用流式细胞仪检测唾液酸化Lewis X（sialyl-Lewis X,sLe~X）阳性率及E-选择素结合率。使用Hank平衡盐溶液重悬的岩藻糖基化BMSCs作为实验组（A组）,未经岩藻糖基化修饰的BMSCs作为研究对照组（B组）,添加EDTA冲洗的岩藻糖基化兔BMSCs作为阴性对照组（C组）,利用平行板流室黏附试验检测兔BMSCs流体黏附力。结果兔BMSCs形态以长梭形为主,生长旺盛;第3代BMSCs CD44、CD29、CD105呈阳性表达,而CD34呈阴性表达。实验组sLe~X阳性率为32.52%±1.76%,显著高于对照组的1.48%±0.51%,差异有统计学意义（t=29.277,P=0.000）;实验组E-选择素结合率为41.05%±1.84%,显著高于对照组的4.33%±0.92%,差异有统计学意义（t=35.674,P=0.000）。随着流体剪切力的增加,A组人脐静脉内皮细胞（human umbilical vascular endothelial cells,HUVEC）表面黏附的BMSCs数量先升高后降低,而B、C组HUVEC表面几乎无BMSCs黏附。各剪切力作用下,A组HUVEC表面黏附的BMSCs细胞数均显著多于B、C组,差异有统计学意义（P〈0.05）,B、C组间差异无统计学意义（P〉0.05）。结论 CD44分子岩藻糖基化修饰能够增强兔BMSCs的流体黏附力。
