摘要:
【目的】建立一种高效、实用的新疆军垦细毛羊肾小管上皮细胞原代培养方案，为肾脏损伤引起的疾病研究奠定基础。【方法】取5～8个月大的出栏细毛羊肾脏皮质，剪成1～2 mm3大小组块，分别采用传统组织块法和改良组织块法，在含15％～20％新生小牛血清的DMEM的培养基中进行原代培养，无需研磨或使用酶和化学试剂，根据上皮细胞自身的生长特性，首次结合刮除法，相差消化法和差速贴壁法，分离纯化上皮细胞，再选用0.037 mm孔径网筛过滤除去肾小球上皮细胞，分离纯化培养肾小管上皮细胞,细胞免疫组化进行鉴定。【结果】改良方法与传统方法相比，细胞贴壁早，生长快，处理时间短，减少了污染机率，提高了细胞培养效率，分离培养的肾小管上皮细胞，纯度达90％以上,细胞呈多角形，鹅卵石状，折光性强，连接紧密，可传至第9代，免疫细胞化学（CK-18）染色鉴定为阳性。【结论】改良的组织块培养与传统的组织块培养以及常用的酶消化培养相比，经济、简单、不易污染，分离培养的肾小管上皮细胞，活性高，纯度高，是一种高效、实用的细毛羊肾小管上皮细胞培养方法。
