侵染节瓜的小西葫芦黄花叶病毒CP基因的克隆、表达及其抗血清的制备

《微生物学报》 宋丽敏[1];卢彩鸽[1];梁文星[1];黄金光[1];李怀方[1]
摘要:
通过鉴别寄主反应、病毒部分序列测定确定了采自广州白云区表现花叶、斑驳症状的节瓜上的病毒为ZYMV.采用RT-PCR方法扩增和克隆了该病毒的外壳蛋白基因,连接到原核表达载体pET-22b(+)上.获得的重组子pET-ZCP转化大肠杆菌BL21(DE3)后,用IPTG进行诱导表达.SDS-PAGE和Western blot分析表明,CP基因在大肠杆菌中获得了高效表达,融合蛋白分子量约为33.0kD.将融合蛋白纯化后免疫兔子,获得了特异性较高的抗血清.ELISA测定其效价为1/4096.
小西葫芦黄花叶病毒 , 外壳蛋白 , 原核表达 , 抗血清
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