摘要:
提取高质量的土壤微生物DNA是进行后续分子生物学试验的前提。在3种常用土壤微生物DNA提取方法的基础上，提出了1种新的优化方案，包括使用添加聚乙烯吡咯烷酮（ PVP）的磷酸缓冲液对土壤进行预洗、联合使用SDS－CTAB和蛋白酶K来破碎细胞、用酚－氯仿－异戊醇（25∶24∶1）除蛋白质和淀粉等杂质、使用PEG8000沉淀DNA、用琼脂糖凝胶回收试剂盒纯化DNA等。比较分析了优化的方法与其他3种常用方法所获得的总DNA产率和纯度的差别，结果表明，优化的方法所提取DNA的D260 nm／D230 nm、D260 nm／D280 nm值均高于其他3种方法，且PCR扩增条带清晰、DNA产率高，土壤中DNA得率达88．76μg／g，表明该方法适宜提取土壤中的微生物DNA，从而为研究广藿香根际土壤微生物种类及其多样性奠定了基础。
