榄香烯诱导人脑胶质瘤U251细胞凋亡及对端粒酶活性和hTERT表达影响的研究

《中国肿瘤临床》 陈春美[1];杨卫忠[1];王春华[1];石松生[1];易海波[1];黄勇[1];王锐[1];杨贤义[1]
摘要:
目的:探讨榄香烯诱导人脑胶质瘤U251细胞凋亡及其影响端粒酶活性及其催化亚单位人端粒酶逆转录酶(hTERT)表达的机制。方法:将榄香烯处理人脑胶质瘤U251细胞株后,用MTT法检测细胞增殖抑制率.并求出半数抑制浓度(IC50),倒置显微镜和电镜观察经榄香烯处理的U251细胞形态。流式细胞仪和原位末端标记技术检测细胞周期及细胞凋亡率的变化,免疫荧光技术观簪凋亡小体.流式细胞仪测定bcl-2表达水平.端粒重复扩增(TRAP)法测定端粒酶活性的变化,RT—PCR检测bcl-2和hTERT的表达。结果:榄香烯对U251细胞株增殖具有抑制作用,呈剂量和作用时间的依赖性,IC50为0.062mg/ml,倒置显微镜下可见榄香烯组细胞皱缩、变小,电镜下可见具有典型新月形核的凋亡细胞和凋亡小体,流式细胞仪检测榄香烯阻滞U251细胞周期中S期向G2/M期的转变过程,减少有丝分裂,并引起细胞凋亡,免疫荧光技术观察凋亡小体,TRAP法发现榄香烯可以降低端粒酶活性的变化+呈时间和剂量依赖型。RT—PCR分别证实榄香烯降低bcl-2和hTERT基因表达水平。结论:榄香烯诱导人脑胶质瘸U251细胞凋亡,并抑制U251细胞端粒酶的活性,榄香烯作用于胺质瘤的分子生物学机制可能通过抑制bc1-2表达,下调hTERT基因,降低端粒酶的活性,从而诱导细胞调亡。
榄香烯 , 胶质瘤 , 细胞凋亡 , BCL-2 , 端粒酶 , HTERT
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