摘要:
牛樟芝（Antrodiacamphorata）是一种珍稀食药用菌，能产生具有抗癌活性的倍半萜类化合物。本研究通过对牛樟芝基因组进行分析，获得倍半萜合酶基因序列并设计特异引物，提取在Glu培养基（麦芽浸粉6g/L，酵母提取物3g/L，葡萄糖40g/L）上生长的牛樟芝菌丝体的RNA，利用RT-PCR技术克隆得到倍半萜合酶基因AcTPS1。AcTPS1基因cDNA全长为969bp，编码323个氨基酸，根据系统进化树可知AcTPS1氨基酸序列与其他9种真菌倍半萜合酶聚为一类。AcTPS1拥有典型倍半萜合酶的结构域（RRSRSATAEAYACFIW），之后检测AcTPS1在不同培养基上的菌丝中的表达结果显示不同碳源中，只有葡萄糖作为碳源时该基因表达，不同氮源中，以番茄浸粉和酪蛋白胨为氮源时该基因表达。说明AcTPS1是一类诱导型表达的基因。本研究为利用发酵培养以及异源表达手段获得牛樟芝活性化合物奠定重要的理论基础。
