摘要:
以油桐的近成熟种子为材料,根据油桐转录组测序结果设计引物,采用RT-PCR技术克隆了油桐长链脂酰辅酶A合成酶基因家族的两个成员的全长cDNA序列,分别命名为VfLACS4(Gen Bank登录号:KP996689)和VfLACS8(Gen Bank登录号:KT362743),通过实时定量PCR的方法检测了不同组织部位和种子不同发育时期该基因的表达水平,并采用索式提取法测定了种子发育时期的油脂含量。结果表明:VfLACS4的CDS长度为1 989 bp,编码662个氨基酸,与其他物种的LACS4氨基酸序列具有较高的相似性,其中与蓖麻的LACS4相似性最高;VfLACS8的CDS长度为2 199 bp,编码732个氨基酸,与麻疯树和蓖麻的LACS8具有较高的相似性;实时定量RT-PCR结果表明VfLACS4基因在花、茎、叶和根中均有少量表达,并在种子发育的10月10日表达量达到最大;VfLACS8基因在种子、花、茎、叶和根中均有一定量的表达,在雌蕊中的表达量最高;油桐种子发育过程中的油脂积累呈现出"S"型,Vf LACS8基因的在发育种子中的表达模式与之相一致,推测VfLACS8基因与种子发育过程中的油脂积累相关。