摘要:
以山新杨（Populus davidiana Dode×P．bollena Lauche）为受体材料，在筛选遗传转化条件的基础上，利用农杆菌介导叶盘转化法进行了Bt＋蜘蛛杀虫肽基因转化研究。结果表明：在叶片转化时，卡那霉素的临界质量浓度为10mg／L；生根筛选培养时卡那霉素的临界质量浓度为15mg／L；利用质量浓度为600mg／L的头孢噻肟钠脱菌，对叶片生长和不定芽形成影响不大。山新杨遗传转化的工程菌菌液浓度以0．1—0．2（OD600）为最佳，其叶片分化率为73％－77％、抗性芽率为20％－23％；浸染时间以2～5min为宜，其叶片分化率和抗性芽率最高。在共培养基中加入200μmol／L的乙酰丁香酮，其叶片分化率和抗性芽率分别比对照提高1．43倍和2．61倍。对转化植株的PCR检测结果呈阳性．初步证明外源基因Bt＋蜘蛛杀虫肽导入并整合进了山新杨基因组。
