人参属中药材高分辨率熔解曲线鉴定及其方法学考察

《药物分析杂志》 陈康[1,2];蒋超[1];金艳[1];赵玉洋[1];黄璐琦[1];袁媛[1]
摘要:
目的:建立基于高分辨率熔解曲线鉴别人参中药材的方法,并进行系统性方法学考察。方法:采集不同产地的人参中药人参西洋参三七以及市场上常见混伪品竹节参、珠子参、羽叶三七。所有样品提取总DNA,筛选合适的引物,构建人参属正品中药材熔解曲线。同时对不同比例混合样品进行了鉴别,对该方法的灵敏性与特异性、重复性、稳健性、检出限进行了系统性考察。结果:选择psbA-F/trnH-R引物,在模板质量浓度1.6~200 ng·μL~(-1),退火温度为54~60℃,引物浓度为0.1~0.3)μmol·L~(-1)范围内,对人参中药材共75份样品进行高分辨熔解曲线分析人参西洋参三七、羽叶三七、竹节参、珠子参等均获得正确稳定的分析结果。结论:高分辨熔解曲线依据分型分析可以区分人参中药材,并对其混伪品进行检测。在此基础上本文提出了中药分子鉴定方法学研究标准程序,为进一步规范中药分子鉴定方法学研究提供依据。
中药材 , DNA分析 , 人参属 , 掺伪品 , 分子鉴定 , 高分辨率熔解曲线 , 方法学考察
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