摘要:
目的研究不同浓度甘青铁线莲活性成分APG对H9C2大鼠心肌细胞缺血再灌注损伤的保护作用及其可能的机制。方法体外培养H9C2大鼠心肌细胞,经2μM/L和4μM/L的APG预处理24 h后,建立缺氧复氧损伤模型（I/R）（缺氧45 min,复氧3 h）。采用CCK-8法检测细胞活力,检测细胞培养液乳酸脱氢酶（LDH）的释放量、丙二醛（MDA）的释放量和细胞内超氧化物歧化酶（SOD）的活力;采用Western Blot法检测细胞内蛋白激酶Cε（PKCε）、Caspase-3、Bax和Bcl-2表达情况,使用特异性PKCε抑制剂CHE观察PKCε信号通路在此过程中的作用。结果 I/R处理可抑制H9C2细胞活性,细胞培养基中LDH、MDA含量升高,SOD活力降低（与Control组比较,P〈0.05）。抑制PKCε表达,上调Caspase-3表达,下调Bcl-2/Bax比例（与Control组比较,P〈0.05）。2μM/L和4μM/L的APG预处理均可发挥细胞保护作用,降低LDH与MDA释放量,提高SOD活力（与I/R组比较,P〈0.05）。此外,APG处理对抗了I/R损伤引起的PKCε表达下调,抑制Caspase-3表达,提高了Bcl-2/Bax比例（与I/R组比较,P〈0.05）。CHE处理后细胞活力下降,Caspase-3表达上调,Bcl-2/Bax比例下降,凋亡增加（与APG＋I/R组比较,P〈0.05）。结论甘青铁线莲中活性成分APG可减轻心肌缺血再灌注损伤,其机制可能是激活PKCε相关信号通路,最终抑制心肌细胞凋亡。
