摘要:
目的 构建广西眼镜王蛇毒酸性磷脂酶A2-1（APLA2-1）在不同载体的重组表达质粒，在Ecoli中表达APLA2-1并比较不同表达系统对APLA2-1的表达效果。方法将广西眼镜王蛇毒酸性磷脂酶A2-1（AP-LA2-1）基因克隆至表达载体pBLMVL：和pET28a（＋），分别转化人大肠杆菌RRl和BL21，经过诱导表达，应用SDS-聚丙烯酰胺凝胶（SDS-PAGE）及Western blot观察重组蛋白表达情况。结果 成功构建了重组质粒pBLMVLz-APLA2-1和pET28a-APLA2-1。pBLMVL2-APLA2-1在SDS-PAGE上没见明显表达带，在Westernblot上可见一14kD的表达带。pET28a-APLA2-1在SDS-PAGE上有一明显的18kD表达条带，表达产物AP-LA2-1约占细菌总量30％，并以包涵体的形式存在。结论 APLA2-1可在大肠杆菌中表达，pET28a（＋）对APLA2-1的表达效果优于pBLMVL2。
