摘要:
近年来猪传染性胃肠炎和猪流行性腹泻在我国广泛流行,给养殖业带来了巨大的经济损失。目前对此两种疾病的防治手段还停留在使用常规疫苗。现有的疫苗免疫效果不够理想,急需寻求一种安全高效的防治手段。本文首先构建了猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）和猪流行性腹泻病毒（PEDV）融合S基因,以乳酸乳球菌食品级细胞壁锚定高效诱导表达载体p RNV48为基础,构建了TGEV和PEDV融合S基因的表达质粒p RNV48-TPs。将得到的重组质粒用电穿孔方法转入乳酸乳球菌NZ9000感受态细胞中,获得了重组菌乳酸乳球菌Z9000/p RNV48-TPs。再利用nisin对重组菌进行诱导,提取细胞壁蛋白后采用聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）分析目的蛋白的表达情况,然后分别对兔子进行注射免疫和口服免疫,并用Western Blot分析。通过乳酸乳球菌食品级细胞壁锚定高效诱导表达载体,诱导表达TGEV与PEDV融合S蛋白产生中和抗体,以期探讨口服疫苗的免疫反应机理,为由TGEV与PEDV研发的安全、高效的疫苗奠定良好的基础。
