摘要:
目的建立肝脏特异性自身抗体的ELISA检测方法,辅助自身免疫性肝炎的诊断.方法利用亲和层析法从人肝脏组织中直接纯化去唾液酸糖蛋白受体(ASGPR),经免疫学鉴定后以此纯化抗原包被微孔板,酶联免疫固相吸附试验检测去ASGPR的自身抗体(抗-ASGPR).结果本研究从10 g肝组织纯化ASGPR,总量为1.6 mg.经SDS-PAGE和Dot-ELISA验证,纯化ASGPR纯度高、具有抗原活性.ASGPR预吸附可阻断血清抗体与ASGPR间的免疫反应,类风湿因子、梅毒阳性血清不干扰本ELISA法的抗原抗体反应.33例自身免疫性肝炎(AIH)患者中检出抗-ASGPR 24例,阳性率为72.7%.在临床上高度怀疑AIH的10例患者中,抗-ASGPR阳性者有7例.原发性胆汁性肝硬化、病毒性肝炎、肝炎后肝硬化、肝癌、胆囊炎患者中阳性检出率分别为21.4%(9/42)、16.8%(16/95)、16.1%(10/62)、10.7%(3/28)、14.3%(1/7).药物性肝炎、酒精性肝炎、系统性红斑狼疮和类风湿性关节炎患者中未检测到抗-ASGPR.200名健康体检者阳性率为4.6%.抗-ASGPR检测对AIH诊断的特异性为89.6%.结论本研究所建立的抗-ASGPR ELISA检测方法可靠、特异性好.抗-ASGPR检测有助于AIH的诊断,尤其是对那些抗核抗体、平滑肌抗体、肝肾微粒体-1型抗体等自身抗体均阴性、临床高度怀疑AIH病例的诊断可能更为有用.
