摘要:
目的利用环介导恒温扩增技术，以空肠弯曲菌的VS1基因设计引物，建立快速检测空肠弯曲菌的方法，以期能应用于急性腹泻和肠炎等疾病的快速检验。方法①通过基因比对与引物设计，设计针对空肠弯曲菌的环介导恒温扩增检测（LAMP）方法；②用钙黄绿素、亚甲基蓝、结晶紫、溴化乙锭4种DNA染料对扩增产物进行染色，评价各染料染色效果；③检测该LAMP方法对空肠弯曲菌及其他干扰菌的扩增情况，评价其特异性；④将该LAMP方法与培养法比较，进行统计学分析。结果①设计出针对空肠弯瞄菌的LAMP检测方法；②钙黄绿素与扩增产物结合后颜色变化明显，是该LAMP方法中较好的DNA染料物质；③本LAMP检测方法只针对空肠弯曲菌有扩增，对其他干扰菌不扩增，显示出良好的特异性；④试验共检测了60株临床和标准菌株，对于菌株的培养物，LAMP检测结果与培养鉴定法比较差异无统计学意义（x2=0．3333，P〉0．05）。结论本试验设计出了针对空肠弯曲菌LAMP检测方法，该LAMP法较好的DNA染料物质是钙黄绿素，该方法具有良好的特异性，与培养鉴定法比较具有较高的阳性、阴性及总体符合率，能够用于空肠弯曲菌的快速检验。
