β-榄香烯通过线粒体凋亡途径逆转肺癌A549/ DDP细胞耐药

OncologyReports 31: 2131-2138, 2014

《肿瘤报道》 SCI影响因子 2.297

作者：CHENG-CAI YAO1,2,YUAN-RONG TU1, JIE JIANG3, SHENG-FANG YE4,HAO-XIN DU2 and YI ZHANG2

1福建医科大学附属第一医院胸外科，福建福州，355000；

2福建中医药大学附属厦门中医院胸外科，厦门361009；

3厦门大学附属第一医院胸外科，厦门361001;

4厦门大学分子生物学院，厦门361000，中国

摘要

β-榄香烯（β-ELE）是一种新型的从温莪术中提取的新型抗肿瘤药物，并已被广泛用于治疗恶性肿瘤。最近的研究表明β-ELE可逆转肿瘤细胞的耐药性。为了明确β-ELE该作用的可能机制，本研究观察了其对顺铂耐药人肺腺癌A549/DDP细胞的作用。β-ELE对A549/DDP细胞体外生长的影响通过MTT法测定。细胞凋亡情况通过Hoechst 33258染色后荧光显微镜观察以及膜联蛋白V-FITC/PI双染流式细胞仪进行评估。线粒体膜电位通过JC-1荧光探针和激光共聚焦扫描显微镜进行观察，细胞内活性氧水平通过2 '，7'-二氯二乙酸酯染色和流式细胞仪进行评估。胞质谷胱甘肽含量用谷胱甘肽试剂盒进行测定。细胞色素C、胱天蛋白酶-3、胱冬酶原-3和Bcl-2家族蛋白的表达通过蛋白印迹法进行评估。结果表明，β-ELE抑制A549/DDP细胞增殖作用呈现出时间和剂量依赖性。此外，β-ELE可增强A549 / DDP细胞对顺铂的敏感性并逆转A549 / DDP细胞的耐药性。除了激活细胞凋亡的作用外，β-ELE同时以时间和剂量依赖性的形式降低线粒体膜电位，增加细胞内活性氧浓度，降低的细胞质谷胱甘肽水平。β-ELE与顺铂联合使用可增强A549 / DDP肺癌细胞细胞色素c、胱天蛋白酶-3和Bad蛋白的表达，并降低Bcl-2和胱冬酶原-3的蛋白水平。以上结果表明，胱冬酶原-3-β-ELE功能的途径，能够降低线粒体膜电位，通过释放细胞色素c进入细胞质和对细胞凋亡相关基因的调控从而触发细胞凋亡。β-ELE对A549 / DDP细胞系的耐药性逆转可能是从其诱导凋亡的作用中衍生出来的。

关键词：肺癌，耐药性，β-榄香烯，活性氧，线粒体膜电位，细胞凋亡，A549/DDP细胞，谷胱甘肽