我爱做实验 | 一场美丽又意外的遇见

北京中医药大学中药学院

作为药院的学生,大概对实验动物都有所接触吧?那么,让小编猜猜你们是喜欢到处游走的细胞?还是喜欢四处乱窜的小白鼠?是喜欢惹人怜爱的兔子还是温顺又善解人意的比格犬

研究药物经常使用正常动物进行实验,制备各种动物病理模型,病理模型在新药研究中占有重要地位。动物实验操作性强,需要拥有一定的技术水平,在保证研究顺利的同时,熟练掌握操作动物实验的技能。动物实验过程中需要用到许许多多的仪器设备,方法技术,小编简单罗列了一些。

最常使用的仪器:灌胃针、采血管、离心机(分离血清使用)、酶标仪、雾化器、电子鼻、呼吸机等

最常使用的造模类型:诱发性动物模型、抗疾病动物模型及免疫缺陷动物模型(比如裸鼠)等

试验及分析技术:组织病理切片HE染色;PAS染色;免疫组织化学法;estern blot法;RT-PCR、ELISA技术、流式细胞技术、荧光定量检测法等

对于动物实验,动物取材是少不了的,是不是有好多小伙伴内心颤抖彷徨不安了呢?放心,我们根据实验动物福利伦理,在实验过程中尽量减少动物的痛苦,尽最大努力善待它们。动物实验过程中少不了取材,跟着小编学习取材及其组织固定,一起来涨知识吧!

取材事项

  1. 取材应新鲜,否则细胞发生死后变化、自溶及腐败现象

  2. 使用器械必须锋利,勿使组织块受挤压,挤压过的组织均不可用

  3. 组织标本3~4mm厚,利于固定液的渗入

  4. 保持组织块的原有形态,防止收缩等,如胃肠

  5. 保持材料清洁,可用生理盐水冲洗

取材部位

  1. 肺位于胸腔,左肺两叶,右肺三叶,我们通常取肺小叶的中部,不取肺的边缘。取材不宜过大,1cm*1cm*0.3cm为好。

  2. 胃是消化道的膨胀部分,取材一般以空虚为好,胃内有贮存的食物,应先用生理盐水洗干净,因胃易卷缩,故放在滤纸上铺开,再投入固定液中。

  3. 肝脏 人的肝脏左右可分为四叶(大白鼠的肝脏共分为六叶)一般在肝脏右前叶或左外叶中部做纵切或冠状切面,然后分切成若干小块分别投入固定液。取材不宜过大,一般以2~3mm左右为宜。

  4. 取肾脏时,沿着肾外侧缘的中部直到深部作纵剖切面,全部切成两半,在肾的任一半作扇形切面,皮质和髓质部都应切到。

  5. 大脑和小脑 开颅骨,取下硬脑膜,注意不要伤及脑组织。取大脑组织一般是切取大脑半球中央前回和中央后回的部分,作冠状切面;取小脑可在大脑蚓部作纵切面,将脑组织切取为小块组织片先放滤纸上再固定,以防变形。

取材流程

  1. 固定  固定液通常使用10%的甲醛溶液,肺内含有空气,固定液难以渗入,可用注射法固定,再将其投入固定液6-12h,再分别切成小块组织

  2. 洗涤 把渗入组织的固定液洗去

  3. 脱水 组织固定水洗后,含有大量水分,使用溶剂逐步将水置换出来,通常使用乙醇

  4. 透明 其目的是便于浸蜡包埋,有利于光线的透过,通常使用二甲苯

  5. 浸蜡与包埋 用石蜡透入组织内部,使其变硬并将组织包埋进去以便于切片和观察


    接下来就是组织切片啦!需要大家慢慢学习,掌握这门技术喽!还有很多不错的实验技术及方法,都是值得我们去了解与学习的,有一句话小编爱听:学无止尽!!!你呢?喜欢吗?

实验动物不像我们家里备受宠爱的宠物,它们从出生便在动物笼中度过,它们可爱坚强,我们也应善待它们,尽自己最大的努力实现它们最大的价值!



编辑 | 骑士

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