我爱做实验│进过实验室的人，生命中都有一台HPLC
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实验室中分离分析必备仪器是什么？
当然是HPLC。
今天就来给大家介绍一下HPLC 的概况、结构组成和实际操作。
不闻不若闻之，闻之不若见之，
见之不若知之，知之不若行之。
——荀况（战国）
（一）HPLC简介
HPLC（High Performance Liquid Chromatography ）是高效液相色谱，又称"高压液相色谱"。
高效液相色谱是色谱法的一个重要分支，以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。
（二）HPLC组成构造
高效液相色谱仪由流动相储液体瓶、输液泵、进样器、色谱柱、检测器和数据记录与处理器组成。
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流动相储液体瓶
流动相储液体瓶的用途是贮存流动相，一个储液体瓶盛装一种流动相，不能混装。
输液泵
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两种类型：恒流泵和恒压泵。
恒流泵使输出的液体流量稳定；而恒压泵则使输出的液体压力稳定。恒流泵中有往复泵，注射泵；
恒压泵有气动放大泵。其中往复泵最常用。
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进样针
两种类型（平头进样针、圆椎形进样针）：平头进样针，用于HPLC进样阀和样品吸量管上。专用圆椎形针头，可经受多次进样，专门用在自动进样器进样针上。
现在很多都自动进样啦，很方便~~
色谱柱
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色谱柱的分离作用在填料与流动相之间进行，柱子的分类依据填料类型而定。
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检测器
检测器根据不同组分的性质，检测出分离分析的组分。主要有：紫外吸收检测器（UVD）、二极管阵列检测器（PDAD）、荧光检测器（FLD）、示差折光检测器（RID）、蒸发光散射检测器（ELSD）、质谱检测器（MSD）。
数据记录与处理器
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数据记录与处理器具有获取与处理功能。能够把检测器检测到的信号显示出来。
（三）HPLC实操
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流动相前处理
（1）过滤：水相可以直接采用娃哈哈或者屈臣氏纯净水，不用过滤。有机相如果是色谱级别的试剂也可以不用过滤了。含酸或者盐的缓冲液需要微孔滤膜，过滤时选择合适的滤膜。
（2）脱气：可采用超声脱气或在线脱气。一般采用超声脱气。
注：流动相最好现配现用，不要保存太长时间。
样品前处理
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样品先用合适的溶剂溶解，再用容量瓶定容到合适的浓度。最后采用注射器和合适的滤膜过滤到液相小瓶里面，备用。
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仪器设置
（1）仪器使用前给流动相的各管路进行排气泡和冲洗的操作。
（2）然后在泵关闭的状态下装上色谱柱（注意方向），进行色谱柱的平衡。
（3）之后参考文献，根据需要建立好自己的方法，将准备好的液相小瓶放入相应的样品架，准备批处理。
（4）最后，冲洗柱子。
今天的内容就到这里了，
关于HPLC使用过程中的一些常见问题，
我们将会在下期内容里面给大家详细分解。
祝大家实验顺利，爱上做实验~~
编辑│六骑士
