【技巧】CAR-T 细胞医治实体瘤中靶点挑选的研究进展

关心我，要我变成你的专享小太阳吧CAR-T 细胞医治实体瘤中靶点挑选的研究进展张人与，韩双印（郑州大学中心医院，河南省 郑州市 450003）摘 要：嵌合抗原受体装饰 T 细胞（CAR-T）医治是一种根据基因编辑表达跨膜嵌合抗原受体并再次导向性 T 细胞非特异的基因治疗方式 。近些年持续积累的临床医学统计数据确认了 CAR-T 细胞在血夜系统软件肿瘤医治中的安全系数与实效性。实体线肿瘤的性能更加繁杂，高肿瘤异质性等特性使CAR-T细胞的靶点挑选填满挑戰。学术研究们已经勇于探索实体线肿瘤恶变表型所必不可少的适合靶点、找寻最好抗原组成和医治计划方案，现阶段现有一些实体线肿瘤靶点在临床试验中展现了优良的結果。全篇依据现阶段CAR-T细胞医治实体线肿瘤的临床试验結果，就实体瘤靶点挑选的临床医学进度作一专题报告。主题内容：实体线肿瘤；嵌合抗原受体装饰 T 细胞；靶点中图分类号：R730.5 文献标识码：A Research Advances in Target Selection of CAR-T Cells Therapy for Solid TumorsZHANG Ren-he，HAN Shuang-yin（People’s Hospital of Zhengzhou University，Zhengzhou 450003，China）Abstract：Chimeric antigen receptor-modified T cell(CAR-T) therapy is a kind of gene therapy. CAR-T cells are prepared by gene editing, and expresses transmembrane chimeric antigen receptors redirecting T cell specificity. The accumulated clinical data in recent years has demonstrated the safety and efficacy of CAR-T cells in the treatment of hematological malignancies. The biological characteristics of solid tumors are more complex, and the high tumor heterogeneity leads to a more challenging antigenic target selection. Immunologists are exploring the appropriate targets indispensable for the malignant phenotype of solid tumors, finding the best antigen combination and therapeutic regimen, some of which have shown promising results in clinical trials. Based on the recent clinical trials of CAR-T therapy, this review summarizes and further discuss the advances in targets selection of CAR-T therapy for solid tumors.Subject words：solid tumors；chimeric antigen receptor-modified T cell；targets免疫疗法是近些年肿瘤医学临床研究中的一大网络热点，致力于运用人体免疫力细胞的特异性，对含某类抗原表型的恶变肿瘤非特异地破坏。嵌合抗原受体装饰T细胞（chimeric antigen receptor modified T cell，CAR-T） 细胞免疫疗法将抗原和抗体鉴别非特异和 T 细胞潜在性的破坏工作能力紧密结合，使 T 细胞具备新的肿瘤靶点性、破坏特异性和耐受性[1]。近些年，CAR-T 细胞免疫疗法在血夜系统软件肿瘤中的取得成功深受关心。CD19 靶点的 CAR-T 细胞用以医治不易治粒/淋巴结细胞败血症和多种多样B细胞淋巴瘤，并在临床试验中显示信息出令人震惊的完全缓解率（complete remission, CR）和病症稳定率（stable disease，SD）[2]。CAR-T 细胞医治关键运用血夜肿瘤。实体线肿瘤比血夜系统软件肿瘤更加繁杂，怎样挑选适合的CAR-T细胞靶点是学术研究面临的难题。CAR-T 细胞靶点分成两 类：肿瘤非特异抗原（tumor-specific antigen, TSA）和肿瘤关联性抗原（tumor-associated antigen, TAA）。因为肿瘤非特异抗原比较缺乏，现阶段报导的实体线肿瘤 CAR-T 细胞临床试验大多数都紧紧围绕着肿瘤关联性抗原搭建，主要包括间皮素（mesothelin, MSLN）、神经节苷脂 2（GD2）、人们细胞生长因子蛋白激酶2（human epidermal growth factor receptor 2, Her-2）、 癌胚抗原（carcinoembryonic anti- gen, CEA）、男性前列腺非特异膜抗原（prostate-specific membrane antigen，PSMA）等[3]。随之不一样靶点 CAR- T 细胞临床试验的进度，实体瘤中的肿瘤靶点挑选被觉得有大量关键的功效。1 实体瘤 CAR-T 细胞靶点的挑选标准CAR-T 细胞医治实体瘤的一大至关重要的问题取决于实体线肿瘤的抗原表达具备高异质性， 其不但主要表现在肿瘤内（肿瘤内异质性）和病人间（肿瘤间异质性），医治前后左右、初始与发作疾病中间也将会不一样[4]。一部分细胞更非常容易造成抗原排放，抗原弱阳表达的肿瘤细胞排放免疫力进攻并导致发作[5]。理想化状况下，一个在肿瘤中平稳并高表达的自行靶点是实体瘤 CAR- T 细胞医治的总体目标[4]。另一方面，靶点的非特异对 CAR-T 细胞医治必不可少。在历史上，低非特异的靶点鉴别 CAR-T 实体瘤医治造成过 1 例毒副作用恶性事件，2010 年，在靶点 Her-2 的 CAR-T 细胞医治肠癌的临床试验中，因为病人一切正常肺机构中也表达 Her-2 抗原，CAR-T 细胞对病人一切正常肺 机构开展进攻，病人迅速出現了吸气困惑，并在15 天内致死[6]。目前绝大多数实体瘤靶点的一切正常表达一般局限性在非关键内脏器官的上皮细胞，表达水平低，这种抗原搭建的 CAR-T 细胞也在临床试验中显示信息外对一切正常机构水平极轻的危害[7]。不难看出，靶点的挑选应当在非特异和法律效力上做到一个非常好的均衡，保持T细胞破坏功效的另外，保证医治安全系数。除此之外，单链抗原的抗原感染力、表达相对密度等特点危害 CAR-T 细胞激话，与开启细胞融解特异性(融解阀值)对比，诱发细胞系数造成和细胞增殖(激话阀值)必须更高的融合相对密度，挑选抗原感染力适合的抗原表位的是诱发CAR-T细胞毒副作用的重要[8]。B 细胞渊源的血夜系统软件肿瘤中 CD19 的表达贴近100%，其优良的非特异和表达量促进了 CAR-T 细胞在血夜系统软件肿瘤中的取得成功。现阶段，CAR-T 细胞临床实验結果呈现了一些很具发展潜力的实体瘤靶点，为 CAR-T 细胞攻破实体线肿瘤出示了宽阔构思。2 实体瘤 CAR-T 细胞靶点 2.1 间皮素间皮素（mesothelin，MSLN）含量约为 40000Da， 是一种锚连到膜表层的糖蛋白， 因在一切正常机构间皮细胞中表达而出名[9]。MSLN 在肿瘤中的表达十分普遍，约有 95%恶性间皮瘤，80%~85%胰腺癌，68.8% 子宫内膜癌和53%肝癌表达MSLN[10]。MSLN 高表达管控了多种多样细胞信号通路，并与肿瘤增殖、侵蚀和欠佳愈后有紧密联系。MSLN 都是三弱阳宫颈癌异型性标识物，而三弱阳宫颈癌对单抗药品基本上无敏感度，MSLN CAR-T 细胞跻身三弱阳宫颈癌仅有的免疫疗法药品[9]。MSLN靶点的CAR-T 细胞最开始在2011年由 Beatty 等运用电转mRNA 的方法制取，这 种根据 mRNA 短暂性表达CAR 分子结构的 CAR-T 细胞很大减少了 CAR-T 细胞对一切正常机构的安全隐患，她们也在事后的Ⅰ期临床试验中证实了这类设计方案的安全系数，另外包含反映的延续性[11]。2018年，Beatty 精英团队报导了一项Ⅰ期临床试验的結果：6 例胰腺癌病人接纳了 MSLN CAR-T 细胞医治，均出現了分别不一样的抗肿瘤反映，2 例病人得到了 3.8 月和 5.4 月的 SD 反映， 在其中 1 例病人的肿瘤机构活跃性新陈代谢数据信号降低了 69.2%，且肝迁移灶所有消退[12]。现阶段有多种 MSLN CAR-T 细胞的临床试验已经开展，并在探寻不一样的转导方法和协同医治方式对 MSLN CAR-T 细胞法律效力的危害。2.2 神经节苷脂 2神经节苷脂2 （diasialoganglioside2, GD2）是一种双唾液酸神经节苷脂，一切正常表达在外周神经细胞和一部分中枢系统上，具有推动细胞间黏附的功效[13]。在神经系统母细胞瘤中合黑色素瘤中 GD2 表达大幅度上涨，并可做到100%的表达率（神经系统母细胞瘤）。GD2 在临床医学上用于血夜检验的肿瘤标识物，能够辨别神经系统母细胞瘤的良恶变[14]；GD2 也被用作神经系统母细胞瘤单克隆抗体医治的靶点，2015年GD2 单抗商品Unituxin被英国FDA准许用以高风险 度神经系统母细胞瘤的临床医学医治。Louis 等第一次搭建了 GD2 靶点的 CAR-T 细胞医治神经系统母细胞瘤，该试验也变成了 CAR-T 细胞医治实体瘤中的經典试验[15]。以便出示共刺激性源，她们将病人脂肪移植 EB 病毒感染反映性T细胞也做为 CAR-T 细胞的搭建质粒载体。比照表达 GD2 CAR 的一般外周血单独核细胞（PBMC）细胞，她们证实了 EB 病毒感染的共刺激性能够提升 CAR-T 细胞的延续性。Ⅰ期临床试验数据显示，19 例病人中有 3 例病人得到了完全缓解，也未观查到除开轻微痛疼以外的显著副作用[15]。2016 年，在贝勒医学院发布的 一项 GD2 CAR-T 细胞临床试验的結果中，11例神经系统母细胞瘤病人中有 5 例得到 SD，经事后填补医治 2 例得到 CR；实验未观查到显著不良反应反映[16]。现阶段 GD2 CAR-T 细胞在实体瘤中的功效更为明显，并有期待变成进到Ⅲ期临床试验，变成第一个进到 Ⅲ期临床试验的实体瘤 CAR-T 细胞靶点。2.3 癌胚抗原癌胚抗原（carcinoembryonic antigen CEA）是一种膜表层酸碱性糖蛋白，是消化道肿瘤和一些腺癌的基本血清学标识物，在超出 75%胰腺癌、60%结直肠癌中表达[17]。CEA 表达也出現在一切正常粘膜腔内，但局限性在上皮革内部细胞上；肿瘤中 CEA 表达丧失这类旋光性而出現在每一肿瘤细胞表层，并具有推动肿瘤细胞黏附、侵蚀的功效[18]。在Hawkins等的临床试验中（NCT01212887），14 例发作迁移的肠胃肿瘤病人接纳了 CEA CAR-T 细胞合拼 IL-2 打针的医治， 在注射液量增长方式下，7 例病人得到 SD[19]。第三一声 高校钱程专家教授精英团队报导了 CEA CAR-T 细胞在10例末期结直肠癌病人中的运用，7 例病人获 SD，在其中 2 例出現显著肿瘤变小， 全部病人均观查到血细胞 CEA 不一样水平降低[20]。CEA CAR-T 细胞的安全系数早已获得了广泛认证，怎样提升CEA CAR-T 细胞的延续性和抗肿瘤特异性是将来的研究内容。2.4 人细胞生长因子蛋白激酶-2人细胞生长因子蛋白激酶-2（Her-2）是一种生物大分子的Ⅰ型跨膜蛋白，别称ErbB2，是 ErbB 蛋白激酶大家族的一员。Her-2 能够与 ErbB 大家族别的蛋白激酶如EGFR 融合产生同宗或异源二聚体，管控细胞间信号通路，推动细胞增殖、毛细血管转化成和肿瘤的产生发展趋势[21]。Her-2 最开始在宫颈癌中科学研究，宫颈癌中基