屎肠球菌荚膜多糖的提取纯化及其多糖含量的测定

《中国畜牧兽医》 刘永安;李学瑞;周建华;马丽娜;刘永生
摘要:
为提取纯化屎肠球菌(E.faecium)荚膜多糖(CPS)并测定其多糖含量,试验采用高压法破碎菌体,加入核糖核酸酶(25μg/mL)、脱氧核糖核酸酶(0.5mg/mL)、溶菌酶(0.25mg/mL)及蛋白酶K(1.25mg/mL)等去除核酸蛋白质,得到荚膜多糖粗提物,经过30ku和100ku超滤离心管超滤浓缩和DEAE Sepharose Fast Flow层析柱层析后,得到纯化的屎肠球菌荚膜多糖,再利用苯酚-硫酸法测定其含量。结果表明,成功从屎肠球菌中提取纯化出荚膜多糖,其含量为75.21%,初步确定了屎肠球菌荚膜多糖的提取纯化方法,为今后相关疫苗的研制奠定了基础。
屎肠球菌 , 荚膜多糖 , 提取纯化 , 苯酚-硫酸法
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