摘要:
胸膜肺炎放线杆菌（APP）是重要的猪呼吸道病原菌，给世界养猪业造成严重的经济损失。信号标签突变（STM）技术是在宿主动物体内鉴定病原菌毒力因子的高通量方法。通过体外传代选育出APP血清1型和3型萘啶酸抗性菌株，再以萘啶酸抗性菌株为受体菌，以携带mini-Tn10的标签质粒（pLOF／TAG1-48）的E．coliCC118 λ pir或S17-1 λ pir为供体菌，在或不在E．coli DH5α（pRK2073）的辅助下，进行三亲本或两亲本接合，通过抗性筛选、PCR和Southern杂交鉴定转座突变株。结果表明：体外萘啶酸加压传代很容易选育出萘啶酸抗性APP菌株，该抗性的产生与DNA促旋酶A亚基基因gyrA的突变有关。在APP与E．coli接合实验中，两亲本接合比三亲本接合操作更简单，效率也较高：APP不同菌株在接合和转座效率上存在很大差异，血清1型菌株高于血清3型菌株，3型标准菌株高于地方分离株JL03-R。本研究为APPSTM突变体库的构建与毒力基因的鉴定奠定了基础。
