摘要:
探讨乌苯美司对肿瘤细胞侵袭及凋亡的影响及其剂量关系,探讨其作用机制。采用免疫荧光法检测CD13/APN在HT-1080细胞中的表达;MTT法检测乌苯美司对HT-1080细胞增殖的影响;Annexin V-EGFP/PI双染法检测乌苯美司对HT-1080细胞凋亡的影响;流式细胞术检测乌苯美司对HT-1080细胞周期的影响;运用Ala-pNA为底物,检测乌苯美司对细胞表面氨肽酶活性的抑制作用;Transwell法检测乌苯美司对HT-1080细胞侵袭及运动能力的影响;明胶酶谱法检测乌苯美司对基质金属蛋白酶活性的影响;Western blotting法检测CD13的表达变化。研究结果显示,高浓度的乌苯美司可抑制HT-1080细胞的增殖（IC50：3.8 mg.mL-1）,诱导HT-1080细胞的凋亡,将细胞周期阻滞于G1期;在低浓度时乌苯美司即可显著抑制HT-1080细胞的氨肽酶活性（IC50：8.3μg.mL-1）,抑制细胞的侵袭能力,但对细胞的运动能力及增殖无影响;乌苯美司对CD13的表达及基质金属蛋白酶的活性无明显影响。以上研究结果表明,乌苯美司在低浓度时可通过直接抑制细胞表面的氨肽酶活性而抑制肿瘤细胞的侵袭;在高浓度时可通过非CD13依赖的途径抑制肿瘤细胞的增殖,诱导细胞凋亡。
