摘要:
背景性激素在干眼症的发病过程中起着重要的作用，尤其是对泪腺的功能起到非常重要的调控作用，但其对泪腺上皮细胞凋亡作用的机制尚不完全明确。目的探讨雌二醇及丙酸睾酮对H2O2诱导的兔泪腺上皮细胞的凋亡作用。方法分离2～3月龄雄性普通级新西兰兔的泪腺组织，用组织块培养法体外培养兔泪腺上皮细胞，用细胞角蛋白（CK）抗体对培养的细胞进行免疫细胞化学鉴定。取对数生长期的细胞，以5×10^-5个／ml接种于96孔板培养44h后，培养基中分别加入1×10^-5、1×10^-6、1×10^-7、1×10^-8mol／L的雌二醇或丙酸睾酮培养24h，再加入1×10^-4 mol／L H2O2培养1h诱导细胞凋亡，仅用H2O2作用的细胞作为凋亡对照组，常规培养的细胞作为空白对照组。MTT比色法检测各组细胞570nm处泪腺上皮细胞活性的吸光度（A570）值，流式细胞仪Annexin V／PI双染法检测各组细胞的凋亡情况。结果培养的细胞呈不规则多边形，其中80％以上的细胞对CK呈阳性反应。MTT比色法检测表明，与空白对照组比较，凋亡对照组、不同浓度雌二醇组和丙酸睾酮组的A。值均明显降低，差异均有统计学意义（P〈0．01），1×10^-5、1×10^-6、1×10^-7mol／L雌二醇组和1×10^-6mol／L丙酸睾酮组的A570值均明显高于凋亡对照组，差异均有统计学意义（P〈0．01）。与相应浓度丙酸睾酮组相比，雌二醇组A570值均明显增高，差异均有统计学意义（P〈0．01）。与凋亡对照组比较，丙酸睾酮组和雌二醇组早期及晚期细胞凋亡率均明显下降，差异均有统计学意义（P〈0．01，P〈0．05）；与丙酸睾酮组相比，雌二醇组早期及晚期的细胞凋亡率明显下降，差异均有统计学意义（P〈0．01，P〈0．05）。结论雌二醇及丙酸睾酮可抑制H2O2诱导的泪腺上皮细胞的凋亡，雌二醇的抑制作用强于丙酸睾酮。雌二醇对泪腺上皮细
