摘要:
目的：探讨SPE及其单体对嘌呤霉素氨基核苷（PAN）诱导的损伤足细胞中Toll样受体4（TLR4）通路表达的影响。方法：足细胞与含有甘西鼠尾草总酚酸提取物（SPE）、迷迭香酸（RA）、丹酚酸B（SalB）、RA＋SalB混合及他克莫司的完全培养液预先孵育30 min,再加入PAN（100μg/ml）继续作用24 h,观察足细胞骨架结构F-actin变化,western blot及半定量RT-PCR检测足细胞中TLR4、myd88、phosphor-NF-κB（pp65）在蛋白及mRNA水平的表达量变化。结果：（1）PAN作用24 h后,足细胞骨架蛋白F-actin明显损伤,微丝解聚、胞体回缩,少数细胞尚存排列紊乱的丝状结构,而提前给予保护药物SPE、SalB、RA、SalB＋RA混合药物及他克莫司组的足细胞损伤明显减弱。（2）western blot数据显示,PAN诱导的损伤足细胞中TLR4、myd88及pp65蛋白的表达与正常组相比均有明显上调（P〈0.05）;保护药物组：TLR4蛋白表达较模型组有明显下降（P〈0.05）;My D88蛋白表达除SalB高剂量组及SalB＋RA低剂量组较模型组无显著下降外,其余均能明显下调其表达量（P〈0.05）;pp65在保护药物组中的表达均较模型对照组低（P〈0.05）。（3）半定量RT-PCR结果显示,模型对照组中TLR4、My D88及NF-κB的mRNA表达量明显高于正常对照组;保护药物组中：TLR4 mRNA表达量在各药物处理组中均明显低于PAN组（P〈0.05）,其中的SPE高、低剂量组,RA高、低剂量组,SalB＋RA高剂量组与正常组相接近（P〉0.05）;My D88 mRNA表达量在SPE及其单体处理后均有明显下调（P〈0.05）;NF-κB mRNA表达量除SalB高剂量组中无明显下调外（P〉0.05）,其余各保护药物组均下调（P〈0.05）。结论：SPE及其活性单体对PAN诱导损伤足细胞的保护作用机制可能部分通过抑制TLR4信号相关蛋白表达来实现;甘西鼠尾草总酚酸提取物中的单体迷迭香酸对TLR4及其下游信号分子My D88、NF-κB的抑制作用优于丹�
