摘要:
目的：建立梯度洗脱反相高效液相色谱法测定头孢尼西钠中的有关物质。方法：采用梯度洗脱方法，用C18BDS（Thermo Hypersil—Keystone，250mm×4．6mm，5μm）色谱柱，以0．01mol·L^-1磷酸二氢钾溶液（用磷酸调节pH值至3．5）-乙腈（95：5）为流动相A，乙腈为流动相B；以1．0mL·min^-1的流速进行梯度洗脱，梯度洗脱条件：0～6min，A为94％；6～20min，A从94％→30％；20～27min，A为70％；27～28min，A从70％→94％；28～35min，A为94％；检测波长为272nm。通过加热破坏的方法，制备系统适用性溶液，对已知杂质进行定位。结果：在选定的色谱条件下，3-TSA、7-ACA2个相邻杂质分离度达到4．1，在等度洗脱时保留时间超过80min的甲酰头孢尼西缩短为21min。通过加热破坏的方法，可以将不易得到对照品的3-TSA进行准确定位。结论：该方法测定灵敏，选择性、重现性好，即可以将不易分离的相邻杂质进行有效分离，又可大大缩短分析时间，符合常规检验的要求。
