摘要:
目的:探讨梯度高糖对体外培养成骨细胞(osteoblast,OB)的影响.方法:采用胰蛋白酶-Ⅱ型胶原酶消化法从1～2日龄SD大鼠颅盖骨中分离出OB,倒置显微镜下及HE染色观察其形态,碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALPase)染色法、钙化结节染色、Van-Gieson染色鉴定细胞后用不同浓度的糖溶液加入到成骨细胞培养体系中,作用不同时间,应用MTT比色法、ALPase含量测定、矿化结节形成量等来检测其对成骨细胞增殖和成骨能力的影响.结果:不同浓度的糖溶液在OB培养48 h时具有明显的促进增殖作用,但＞15 mmol/L的溶液在72 h时则呈抑制效应,其中以≤15 mmol/L的糖溶液在培养早期有显著促进作用(P＜0.05或P＜0.01),而在培养较长时也无明显抑制效应;≥30 mmol/L的糖溶液在OB培养7 d时显著抑制ALPase的分泌(P＜0.05);≥10 mmol/L的糖溶液在培养18 d时对矿化结节的形成也具有明显的延迟效应;＜10 mmol/L的糖溶液对OB分泌ALPase及矿化结节形成无抑制作用.结论:高糖可影响OB增殖、分化与矿化能力,OB增殖耐受的糖浓度为≤15 mmol/L,OB分化与矿化过程耐受的糖浓度为＜10 mmol/L.
