摘要:
分析了影响农杆菌共培养转化谷子的因素,初步建立的谷子农杆菌共培养适宜转化体系为:以幼穗诱导的愈伤组织为转化材料,农杆菌浓度OD600为0.5,已酰丁香酮为100 μM,浸菌附加超声波或真空处理,22 ℃共培养2~3 d后水洗2遍,于含羧苄西林钠和头孢唑林钠各250 mg/L的0.1%甘露醇浸泡30 min除菌,接于选择培养基上进行筛选并继代和再生,最后于1/2 MS中生根成为完整小植株.用含Bt基因的双元载体农杆菌LBA4404和EHA101,按所建立的转化程序,对豫谷1号、高39、鲁谷10号等优良品种的愈伤组织进行了转化.共获致密型抗性愈伤组织75个,经再生获得35株抗性植株.