摘要:
目的探讨β-丙内酯灭活双价Vero细胞肾综合征出血热纯化疫苗的最佳条件.方法采用不同终浓度的β-丙内酯和不同的灭活时间对疫苗进行灭活,用细胞培养法进行病毒增殖试验,以确定灭活效果.应用高效液相色谱法分析β-丙内酯的最佳水解条件和3批双价vero细胞出血热纯化灭活疫苗β-丙内酯残留量.检测3批双价纯化灭活疫苗的免疫效果.结果疫苗经终浓度为1∶2 000和1∶4 000的β-丙内酯作用24 h,均可完全灭活病毒;疫苗中的β-丙内酯在37 ℃水浴下,随着水解时间的延长,其含量逐渐下降,水解2 h后已无β-丙内酯检出;3批经β-丙内酯灭活的双价Vero细胞出血热纯化疫苗均未检出β-丙内酯残留,在家兔体内诱导产生针对汉滩型和汉城型病毒的中和抗体效价均达到1∶20.结论肾综合征出血热纯化疫苗经终浓度为1∶4 000 β-丙内酯4 ℃灭活24 h,然后再于37 ℃水浴中水解2 h,既可达到完全灭活病毒且无β-丙内酯残留的目的;采用此方法灭活的双价Vero细胞肾综合征出血热纯化疫苗保持良好的免疫原性.
