朝鲜蓟细菌性根茎腐烂病病原的分离与鉴定

在湖南省常德市西洞庭管区种植的朝鲜蓟（Cynara scolumus L.）上发现了一种新的病害,其症状表现为地上部分从外层叶片开始逐步枯萎,随后根部和主茎杆的髓部腐烂变褐,最后整株枯萎。从田间感病朝鲜蓟茎杆的病健交界处用NA培养基分离,获得10个菌株,分别指定为HNXDT001～010,并进行了致病性测定、形态观察和细菌学特征分析,同时对HNXDT002菌株进行分子生物学鉴定。结果表明,该系列菌株在NA培养基上均形成灰白色圆形菌落,稍突起,有光泽,半透明。在显微镜下菌体呈短杆状,两端钝圆,具有2～8根周生鞭毛,革兰氏阴性。10个菌株通过针刺法接种均可导致朝鲜蓟茎杆、胡萝卜、辣椒、白菜、土豆、番茄和莴苣茎杆软腐,经科赫法则验证为致病病原菌。该菌株的16S rDNA序列和果胶酶基因片段测序（分别用16S rDNA通用引物16SF/16SR和果胶酶基因引物Y1/Y2扩增）与系统发育学分析表明,其16SrDNA序列（GenBank Accession No.JF721958）与胡萝卜软腐果胶杆菌胡萝卜亚种（Pectobacterium carotovorum subsp.carotovorum）菌株ATCC15713（GenBank Accession No.U80197）序列同源性高达99%;果胶酶基因序列（GenBank AccessionNo.JF721960）与胡萝卜软腐果胶杆菌胡萝卜亚种（Pectobacterium carotovorum subsp.carotovorum）PC1菌株（GenBank Accession No.CP001657）序列同源性为93%。结果表明：朝鲜蓟细菌性根茎腐烂病病原为胡萝卜软腐果胶杆菌胡萝卜亚种。