摘要:
【目的】对蒺藜苜蓿ROP进行克隆与表达分析，为深入研究ROP在共生互作过程中的功能提供理论依据。【方法】通过比较基因组学和RT—PCR方法克隆了蒺藜苜蓿的MtROPS,采用半定量RT-PCR方法检测了MtROPY在蒺藜苜蓿不同组织中的表达水平，采用荧光实时定量PCR方法检测了MtROP5在根瘤菌侵染宿主植物根系后72h内不同时间阶段的表达水平。【结果】从蒺藜苜蓿中克隆了含有MtROP5完整编码区的cDNA序列，长度826bp，编码197个氨基酸。序列分析表明，MtROP5编码的蛋白具有典型的ROP蛋白特征结构域，与其它几种植物中ROP蛋白具有高度的同源性和相似性。半定量RT—PCR分析表明，MtROP5在蒺藜苜蓿的根、茎、叶、花、根瘤中均有表达，茎和花中表达量最高，根和根瘤中次之，在叶中表达最弱。荧光实时定量PCR分析表明，与未接种根瘤菌的对照处理相比较，MtROP5在根瘤菌侵染的72h内不同时间阶段的根系中都增强表达。【结论】克隆的cDNA序列是一个蒺藜苜蓿小G蛋白ROP，推测MtROP5可能在共生互作的早期信号传导过程中行使一定的调控作用。
