摘要:
为应用ISSR技术开展毛白杨遗传变异分析、辅助育种、品种鉴定、系统进化等研究,以(GTG)6为引物,通过单因子实验分别研究了退火温度、引物浓度、dNTP浓度、Mg^2+浓度、TaqDNA聚合酶用量对毛白杨ISSR-PCR反应的影响,建立并优化了适宜于毛白杨ISSR分析的扩增体系:20μL PCR反应体系,1×Taq DNA酶缓冲液(10mmol/L IrisHCl,50mmol/LKCl,0.1%Trion X-100,pH9.0),1.5mmol/LMgCl2,1.0U Taq酶,10ng模板DNA,0.2μmol/L引物,0.2mmol/LdNTP,引物(GTG)6的最适退火温度为61℃.