摘要:
采用改进的SDS法抽提大血藤基因组DNA，分析了镁离子、dNTP、模板DNA含量、引物浓度、Taq DNA聚合酶量和BSA浓度对大血藤ISSR-PCR扩增结果的影响，建立了稳定的、可重复的大血藤ISSR最佳反应体系：10μL PCR反应体积中，4×Taq酶配套缓冲液（10mmol／L Tris-HCl，pH9．0，50mmol／L KCl，1g／L Triton X-100），0．5U Taq DNA聚合酶，2mmol／L MgCl2，0．1mmol／L dNTP，12pmol引物，10ng模板DNA，2mg／mL牛血清白蛋白。大血藤的最适退火温度为52．4℃。
