摘要:
半胱氨酸蛋白酶是植物体中重要的蛋白水解酶,广泛参与种子萌发、幼苗发育、胁迫响应和组织分化衰老等生理过程。我们对水稻中半胱氨酸蛋白酶基因OsCP2(Oryza sativa cysteine protease 2)序列进行分析。该基因cDNA全长2279bp,由2个外显子和1个内含子组成;包含1个1089bp的开放读码框,编码1个含362个氨基酸残基的蛋白,在蛋白氨基端有一36个氨基酸组成的信号肽。生物信息学分析表明,OsCP2与大麦半胱氨酸蛋白酶HvCP同源性最高,同属木瓜蛋白酶亚家族。另外,我们构建了pET32a/CP2原核表达载体,通过转化大肠杆菌BL21DE3,成功表达了OsCP2重组蛋白,分子量约为58kD;通过纯化包涵体获得了纯度高达90%以上的重组OsCP2蛋白,这为进一步研究该基因的功能提供了基础。
