摘要:
【目的】克隆茶树甲羟戊酸激酶基因（CsMVK），分析其生物学信息及在不同组织及乌龙茶做青过程中的表达特性，为研究茶叶加工过程中香气形成机制提供参考。【方法】RT-PCR扩增CsMVK基因，应用生物信息学软件对其编码蛋白（CsMVK）的氨基酸序列进行预测分析，通过实时荧光定量PCR（qPCR）分析CsMVK在茶树不同组织及乌龙茶做青过程中的表达特性。【结果】克隆获得的CsMVK基因（GenBank登录号MF668187）全长1455bp，开放阅读框（ORF）长度为1164bp，编码387个氨基酸，蛋白质分子量41.18kD，理论等电点（pI）5.88。CsMVK蛋白具有GHMP_kinases_Ndomain和GHMP_kinases_Cdomain2个功能结构域，定位于细胞质中，不存在跨膜结构和信号肽。系统发育进化树分析结果显示，CsMVK与三七、常春藤的MVK聚为一类，表明茶树与三七、常春藤的亲缘关系最近。qPCR检测结果显示，CsMVK基因在果实中的表达量显著高于其他组织（P<0.05，下同），在不同组织中的表达量排序为：果实＞根＞叶＞茎＞花；在乌龙茶做青过程中，从鲜叶到晒青叶，CsMVK基因的表达量上升，晒青到一摇过程中表达量下降，经过3次摇青，其表达量持续升高并在杀青前达最大值，与其他做青阶段差异显著。【结论】CsMVK基因表达与茶叶香气品质形成有关。
